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流式細胞儀原理

更新時間:2019-09-02瀏覽:3853次

生物實驗中的封閉劑

流式細胞實驗總結:內容包括流式細胞儀 流程、原理、各種類型的樣本操作、樣本準備,以同型對照的理解,及不同情況下如何使用封閉劑等。是本人相當一段時間來的收集以及修正的內容。

流式細胞儀(FCM)是八十年代集單克隆抗體、熒光化學、激光、計算機等高技術發展起來的一種先進儀器,已廣泛應用于免疫學 、生物化學、生物學、腫瘤學以及血液學等方面的研究和臨床常規工作。其中檢測人白細胞表面標志可對白血病、淋巴瘤作用迅速正確的診斷,對淋巴細胞群和亞群進行分類,還能分離純化某一群或亞群細胞。活細胞免疫熒光技術是用于FCM檢測的標本準備,染色后也能在熒光顯微鏡下進行觀察,在某些實驗條件下,活細胞免疫熒光染色后的特異性和敏感性要優于滴片固定的常規間接免疫熒光的結果。

(一) 原理

活細胞表面保留有較完整的抗原 或受體,先用特異性鼠源性單克隆抗體與細胞表面相應抗原結合,再用熒光標記的第二抗體結合,根據所測定的熒光強度和陽性百分率即可知相應抗原的密度和分布。

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